革兰氏染色的注意事项（革兰氏染色的注意事项）

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解答：

1、需要注意的事项

2、1.使用活性生长菌株染色时，老化的革兰氏阳性菌会被染成红色，造成假阴性。

3、2.涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。

4、3.脱色是革兰氏染色成功的关键。脱色不足导致假阳性，过度脱色导致假阴性。

5、实验过程

6、1.取玻片用纱布擦干，用Mark在玻片一侧画一个小圆圈(用于大致确定菌滴的位置)。在火焰上烘烤涂有细菌的部分，以去除油脂。

7、2.涂抹。

8、液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近约5 cm处打开试管盖；右手拿着接种环，在火焰中燃烧消毒。冷却后，从试管中取出一圈菌液，在干净无脂的载玻片上涂上直径约2 mm的薄膜，最后将接种环在火焰中燃烧消毒。

9、固体培养基：首先在载玻片上滴一滴无菌水，然后取少量带接种环的细菌，涂在载玻片上，使其变薄均匀。

10、3.风干：让涂抹物在空气中自然风干。

11、4.固定：让膜面朝上，用火焰固定2-3次(最好不要烫伤手)。

12、5.染色：将固定好的涂片放在报纸上，滴草酸铵结晶紫溶液，染色1分钟。

13、6.水洗：用水慢慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色后可观察细胞形态。

14、7.媒染：滴1滴碘溶液，染1分钟，水洗。

15、8.脱色：吸收残留水分，连续滴加95%乙醇脱色20-30秒，直至出水呈紫色，立即用水冲洗。

16、9.复染：滴加范宏复染3-5分钟，水洗。此时，革兰氏染色结束。

本文到此结束，希望对大家有所帮助。