琼脂糖凝胶电泳原理和方法（琼脂糖凝胶电泳原理）

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1、大小不同的DNA片段在碱性条件下带负电，在电流的作用下从负极向正极移动。根据不同DNA分子片段的大小和形状不同，它们在电场中的游动速率也不同。因此，同时紫外线照射后可以看到DNA的位置，从而达到分离鉴定的目的。

2、琼脂糖凝胶电泳步骤：1 .用蒸馏水清洗制胶工具，准备制胶板，用琼脂封住模具边缘，设置梳子；2.根据待分离样品(DNA)的大小，配制适当浓度的琼脂糖凝胶。准确称取一定量的干琼脂糖粉末，置于适当体积的锥形瓶中，加入一定量的电泳缓冲液(约30ml TAE)；放入微波炉，加热融化，冷却一会儿(不要烫手)。

3、3.将融化的琼脂溶液摇匀，倒入电泳槽中，等待凝固；4.室温固化30-40分钟左右，小心拔出梳子，取出固化的凝胶，放入电泳槽中，准备上样；5.将电泳缓冲液(TAE)倒入电泳槽中；距胶面约1毫米时，清除胶孔内的气泡。

4、6.上样，在5ul DNA样品中加入1ul上样缓冲液和1ul染料，混合均匀，加入凝胶孔中；7.加载后，打开电源，红色正极，黑色负极。DNA样品从负极移动到正极，上样孔侧电压为负40-50v，电压约为30min(40min)；8.电压结束后，关闭电源，观察凝胶成像仪上的电压位置，并与标记进行比较，判断大小。

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