大家好,小君来为大家解答以上问题。电泳原理图,电泳原理很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、大小不同的DNA片段在碱性条件下带负电,在电流的作用下从负极向正极移动。根据不同DNA分子片段的大小和形状不同,它们在电场中的游动速率也不同。因此,同时紫外线照射后可以看到DNA的位置,从而达到分离鉴定的目的。
2、琼脂糖凝胶电泳步骤:1 .用蒸馏水清洗制胶工具,准备制胶板,用琼脂封住模具边缘,设置梳子;2.根据待分离样品(DNA)的大小,配制适当浓度的琼脂糖凝胶。准确称取一定量的干琼脂糖粉末,置于适当体积的锥形瓶中,加入一定量的电泳缓冲液(约30ml TAE);放入微波炉,加热融化,冷却一会儿(不要烫手)。
3、3.将融化的琼脂溶液摇匀,倒入电泳槽中,等待凝固;4.室温固化30-40分钟左右,小心拔出梳子,取出固化的凝胶,放入电泳槽中,准备上样;5.将电泳缓冲液(TAE)倒入电泳槽中;距胶面约1毫米时,清除胶孔内的气泡。
4、6.上样,在5ul DNA样品中加入1ul上样缓冲液和1ul染料,混合均匀,加入凝胶孔中;7.加载后,打开电源,红色正极,黑色负极。DNA样品从负极移动到正极,上样孔侧电压为负40-50v,电压约为30min(40min);8.电压结束后,关闭电源,观察凝胶成像仪上的电压位置,并与标记进行比较,判断大小。
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